技術原理
技術原理 SEERNA?ISH RNA熒光原位檢測是基于信號放大的單分子 RNA 熒光原位雜交技術，通過配對設計的 DNA 連接探針（DLPs）與靶標 RNA 分子互補配對結(jié)合，然后使用具有以RNA為模板進行DNA連接能力的連接酶，進行 DLPs 的第一步連接成半環(huán)；之后以互補的 DNA 為模板，在 Splint連接酶的作用下實現(xiàn) DLPs 的成環(huán)；隨后在 DNA 聚合酶的作用下，進行滾環(huán)擴增反應實現(xiàn)信號放大；最后在滾環(huán)擴增產(chǎn)物上，雜交帶有單個熒光基團標記的檢測探針，進行熒光顯微拍照成像。
實驗流程
（1）樣本前處理
冰凍樣本：切片退凍、固定、脫水和透化等，以便探針和反應所需的酶等成分進入； FFPE樣本：烤片、脫蠟、復水、固定、復性、透化和脫水等。
（2）探針雜交與滾環(huán)擴增：探針與RNA雜交之后連接成環(huán)，通過滾環(huán)擴增放大信號；
（3）熒光成像：檢測探針攜帶特定熒光基團，與靶標基因雜交探針特異性結(jié)合，在顯微鏡下選擇合適的熒光濾塊和曝光 時間進行掃描成像，通過識別熒光信號確定該位置靶向結(jié)合的基因；
（4）圖像分析：在組織圖像中標記每個靶基因，可以進行信號點計數(shù)分析。
產(chǎn)品優(yōu)勢
(1) 高效、特異、高敏
(2) 高信噪比
(3) 可實現(xiàn)256種靶標分子檢測
(4) 亞細胞分辨率
技術優(yōu)勢
產(chǎn)品性能 - 單RNA分子檢測
- 探針設計特異性強
- 5~10對探針/靶標、靈敏度高
- 信號放大、信噪比高
熒光通道 - DAPI 通道、GFP/Cy3/Cy3.5/Cy5/Cy7 通道均適用
- （Alexa Fluor 488/Cy3/Texas Red/Cy5/Alexa Fluor 750）
樣本和靶標
靶標：同時檢測1~4個靶標RNA（mRNA、LncRNA、circRNA、可變剪切等）
樣本：細胞爬片、新鮮冰凍OCT包埋組織切片（FF） 、福爾馬林固定石蠟包埋（FFPE）組織切片和固定后冰凍組織切片
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