技術(shù)原理
微孔板上有超過(guò)26萬(wàn)個(gè)微孔,利用重力沉降的原理依次加入細(xì)胞和beads,由于微孔數(shù)和beads數(shù)遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于細(xì)胞數(shù),從而微孔板上成千上萬(wàn)了微孔內(nèi)部存在一個(gè)細(xì)胞和一個(gè)磁珠,微孔內(nèi)細(xì)胞裂解,磁珠捕獲mRNA(beads上存在標(biāo)記細(xì)胞(CL)和RNA分子(UMI)的標(biāo)簽,以及帶有poly(dT)的寡核苷酸鏈,poly(dT)捕獲mRNA的polyA尾巴),后續(xù)基于磁性收集磁珠(帶有RNA分子),進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,將細(xì)胞和RNA分析標(biāo)簽加到每一個(gè)RNA分子上,以達(dá)到細(xì)胞標(biāo)簽標(biāo)記細(xì)胞,UMI進(jìn)行RNA定量的目的。
通量高:100-60,000細(xì)胞/通道/樣本, 每張芯片最多可分析8個(gè)樣本 ;
支持混養(yǎng):可接受多樣本混合上樣,降低成本;
細(xì)胞捕獲率高:可高達(dá)80% ;
溫和捕獲方式, 捕獲更全細(xì)胞類型:利用重力沉降獲得單細(xì)胞,無(wú)需施加外界壓力,對(duì)于脆弱細(xì)胞更友好;
雙胞率低:0.2%/1000細(xì)胞。
分析流程
分析結(jié)果展示